Dvouleté rostliny jsou ty, jejichž celý vývojový cyklus, tj. od vyklíčení semen až po uvolnění květů a plodů, trvá dvě vegetační období.V první sezóně tvoří pouze růžici listů, ve druhé sezóně výhonky, květy a semena.
Patří sem jak typicky dvouleté druhy, tedy ty, které uhynou ve druhém roce pěstování po uvolnění semene, např. maceška zahradní, zvonek zahradní, náprstník nachový, pomněnka lesní, tak i ty nejhojněji kvetoucí trvalky druhým rokem a již v dalších letech vlivem slabšího kvetení ztrácejí dekorativní hodnotu, kupř.marshmallow růžový, vousatý karafiát, divizna
Dvouleté rostliny se množí ze semen, která se vysévají v květnu, červnu nebo červenci do truhlíků naplněných rašelinovým substrátem nebo přímo do zeměSazenice po 2-3 týdnech ponoříme do vícekomorových palet, květináčů nebo na zem do postelí.
Výsev, řádkový nebo bodový výsev se používá zřídka, aby se předešlo sevření, zejména při použití peletovaných semen. Hotové sazenice se vysazují na trvalé místo, obvykle na podzim nebo po přezimování, na jaře následujícího roku.
Semena slézu zahradního, náprstníku nachového, pomněnky lesní a zvonku zahradního lze zasít přímo do země na pro ně plánované místo.Zatímco semena maceška zahradní, kopretina obecná a hvozdík vousatý se vysévají truhlíky a na trvalé místo se vysazuje hotová sazenice.